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Bilirubin & urobilinogen In urine | Urinalysis

RBC के breakdown से bilirubin or urobilinogen प्राप्त होता है जिसको urine मे detect करते है ब liver ब kidney function का पता लगते है

Bilirubin &  urobilinogen In urine | Urinalysis 


urine  analysis  से  , kidney , urinary  tract  के अलावा liver  के function  के बारे मे information  प्राप्त की जा सकती है अथार्त urine  का bilirubin  बा urobilinogen  का test  करके liver  के functioning  की जानकरी प्रप्त की जा सकती है RBC  के breakdown  से bilirubin  प्राप्र्त  होता है ये yellow  color  का pigment  होता है जो liver  से intestine  मे निकलता है 

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Bilirubin &  urobilinogen In urine | Urinalysis

Bilirubin &  urobilinogen In urine 


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जब bilirubin  liver  मे  water insoluble   bilirubin -albumin   complex  (free bilirubin  और unconjugated  bilirubin  ) के रूप मे पहुँचता  है  तथा liver  मे पौच कर kupffer  cells   के द्वारा  gluco acetic  acid  मे conjugated  ( मिलकर ) होकर  water  soluble  bilirubin  ( water  soluble  bilirubin  ) मे बदल दिया जाता है 


water  soluble   bilirubin  (conjugated  bilirubin  ) को bile  duct   से  gallbladder  मे पहुँचता  है बा gallbladder  से bilirubin , small  intestine  मे खली कर दिए जाता है 


intestine  मे अधिकांश  bilirubin   , urobilinogen  मे convert  हो जाता है बा अधिकांश urobilinogen  ,intestine  से    blood  circulation   मे absorb (अवशोषित)  कर लिया जाता है तथा दोबारा लिवर मे भेज दिए जाता है  तथा कुछ मात्रा मे urobilinogen  को kidney  से  urine  से excrete ( निकाल ) कर दिया जाता है


Note : बाकि सेष urobilinogen  large  intestine  मे stercobilinogen  मे convert  कर दिया जाता है जो feces  (मल) से excrete ( निकाल ) कर दिया जाता है जिसकी वजह से feces  का color  brown  होता है 

 

urobilinogen का colour   intestine  मे color  yellow   brown     रहता है ब ऑक्सीडीसेड( ऑक्सीजन की उपस्त्थि ) मे urobilin  बनता है जो  brown  colour  का होता है  bilirubin  से बनने बाला 99 % urobilinogen feces  (मल)   से stercobilinogen  के रूप मे निकल जाता है ब सेष 1  % urine  से  excrete  हो जाता  है जिससे हम कह सकते है की नोरमल यूरिन मे बिलीरुबिन नहीं पाया जाता है ब स्माल amount  मे urobilinogen  पाए जाता है 


normal  urine  मे bilirubin  नहीं पाया जाता है ब कम मात्रा मे urobilinogen  उपस्थित होता है  जब की   free  ब unconjugated  bilirubin  kidney  से excrete  नहीं होती है क्यों की ये glomerular capsule  से pass (filter  ) नहीं हो पाती है जब की conjugated  bilirubin glomerular  से filter  जाती है  blood  मे abnormal  bilirubin  होने पर urine  से निकल दी जाती है


urobilinogen  की urine  मे मात्रा  से jaundice  को monitor  करने मे help  होती है urobilinogen  color  less  होता है पर  oxidized  होकर  yellow  - brown  दिखाई देता है                                                                                                     

Bilirubin &  urobilinogen In urine | Urinalysis

Bilirubin and Urobilinogen formation




 

Bilirubin &  urobilinogen detection In urine | Urinalysis 


urine analysis के से , kidney , urinary tract के अलावा liver के function के बारे मे information प्राप्त की जा सकती है अथार्त urine का bilirubin बा urobilinogen का test करके liver के functioning की जानकरी प्रप्त की जा सकती है RBC के breakdown से bilirubin प्राप्र्त होता है ये yellow color का pigment होता है जो liver से intestine मे निकलता है

जब bilirubin liver मे water insoluble bilirubin -albumin complex (free bilirubin और unconjugated bilirubin ) के रूप मे पहुँचता है तथा liver मे पौच कर kupffer cells के द्वारा glucoacetic acid मे conjugated ( मिलकर ) होकर water soluble bilirubin ( water soluble bilirubin ) मे बदल दिया जाता है

water soluble bilirubin (conjugated bilirubin ) को bile duct से gallbladder मे पहुँचता है बा gallbladder से bilirubin , small intestine मे खली कर दिए जाता है

intestine मे अधिकांश bilirubin , urobilinogen मे convert हो जाता है बा अधिकांश urobilinogen ,intestine से blood circulation मे absorb (अवशोषित) कर लिया जाता है तथा दोबारा liver मे भेज दिए जाता है तथा कुछ मात्रा मे urobilinogen को kidney से urine से excrete ( निकाल ) कर दिया जाता है

urobilinogen का colour intestine मे color yellow brown रहता है ब oxidation ( ऑक्सीजन की उपस्त्थि ) मे urobilin बनता है जो brown colour का होता है bilirubin से बनने बाला 99 % urobilinogen feces (मल) से stercobilinogen के रूप मे निकल जाता है ब सेष 1 % urine से excrete हो जाता है जिससे हम कह सकते है की normal urine मे bilirubin नहीं पाया जाता है ब small amount मे urobilinogen पाए जाता है

normal urine मे bilirubin नहीं पाया जाता है ब कम मात्रा मे urobilinogen उपस्थित होता है जब की free ब unconjugated bilirubin kidney से excrete नहीं होती है क्यों की ये glomerular capsule से pass (filter ) नहीं हो पाती है जब की conjugated bilirubin glomerular से filter जाती है

blood मे abnormal bilirubin होने पर urine से निकल दी जाती है urobilinogen की urine मे मात्रा से jaundice को monitor करने मे help होती है urobilinogen color less होता है पर oxidized होकर yellow - brown दिखाई देता है



Detection of bilirubin in urine


urine मे bilirubin की उपास्थि को bilirubinuria कहा जाता है urine मे bilirubin को detect करने के लिए कुछ method है जिसमे सबसे पुराना method foam test है जिसमे urine को shake करने पैर urine मे yellow foam को देखा जाता हैurine मे bilirubin की detect करने के लिए reagent strip test भी किया जाता है जो की diazo reaction के आधार पैर कार्य करता है

diazo reaction मई bilirubin , diazonium salt के साथ acid medium मे ozobilirubin बनता है तथा urine मे bilirubin की उपास्थि होने पर positive (color complex बनता है ) ये test bilirubin को detect करने के लिए specific है परन्तु urine मे highly color substance होने पर result false positive हो सकता है इसलिए urine मे bilirubin को detect करने के लिए fouchet's test है


Bilirubin detection by  fouchet's test

Aim of test : determination of bilirubin

Name of the method: fouchet's test

Specimen: urine specimen

Equipment: test tube, test tube holder, Whatman filter paper,mesuring cylender, beaker , funnel

Reagent : Fouchet's Reagent

  • Trichloro Acetic Acid 25gm
  • 10% ferric Chloride
  • Distilled water 100ML

10% barium chloride 10 ML

Principle : barium chloride , urine के sulphate radical से react कर barium sulphate का precipitate बनता है अगर urine मे bilirubin उपस्थित है तो ये urine , fouchet's reagent के साथ oxidation करके bilirubin से biliverdin मे convert कर देगा जो Blue green colour complex बनाएगा

fouchet's test principle
Fouchet's test principle



Procedure :सबसे पहले urine का ph check करते है ब alkaline होने पर urine मे 33 % acidic acid ya megnicium sulphate मिला कर यूरिन को acetic कर लिया जाता है इसके बाद 5 ML यूरिन मे 2.5 ML 10 % barium chloride add करके mix करते है mix करने के बाद mix किये urine को whatman filter paper से filter कर लेते है तथा fouchest regent की एक drop filter paper पर डालते है dry filter paper के center पर अगर fouchest regent डालने पर अगर blue -green color produce होता है तोः ये urine मे bilirubin की उपास्थि को दर्शायेगा color की intensity urine मे उपस्थित bilirubin की उपास्थि के समानुपाती होती है

Result

  • if blue -green color:  positive 

  • Color unchanged: negative


Demonstration video






Detection of Urobilinogen  in urine

Urine urobilinogen : urine  मे urobilinogen  का मापन jaundice (पीलिया)  की condition  को जानने मे मदद करता है  urobilinogen  intestine  मे absorb  हो जाता है किसके कारण urine  मे बहुत कम मात्रा मे urobilinogen  उपस्थित होता है  urobilinogen  मे urine  की मात्रा liver  से intestine   मे निकलने  वाले urobilinogen  पर ब intestine  से absorb  हुए urobilin  पर निर्भर करती है  urobilinogen  fresh  urine  मे color  less  होता है परन्तु  oxygen  की उपथिति मई  urobilin  मे convert  होकर जो orange  - pink  color  का होता है तथा urine  मे urobilin  अधिक मात्रा मे होने पर urine  orange  - yellow   color  का होता है 



urine मे   urobilinogen  को detect  करने के 2  method  है 

  1. Ehrlich  test 

  2. urobilinogen  reagent  strip  test  

Urobilinogen detection by  Ehrlich  test   

Name of the method: Ehrlich  test   

Principle  : urine  मे उपस्थित urobilinogen ,  Ehrlich's reagent के साथ react  करके pink  color  बनती है pink  color  की intensity   urine  मे उपस्थित   urobilinogen    की मात्रा के समानुपाती होती है 

Reaction  :

Urobilinogen + Ehrlich's reagent -----} pink color

Requirement: 2 test tube

Specimen : 2 hour postprandial sample

Reagents

1. Ehrlich's reagent

  • p-dimethylaminobenzaldehyde: 2.0 g

  • Hydrochloric acid (conc.) : 20 ml

  • Distilled water 80 ml

2. 20% v/v hydrochloric acid (HCI)


Procedure :5ML  की test  tube  मे urine or 0.5  ML  Ehrlich  , reagent   डाले ब दूसरी test  tube  मे  २०% HCL  डाले तथा 3-4 minutes  के लिए  room temperature  पर mix  करे  ब color  दिखने पर result  note  करले

Results

  • Normal urine + Ehrlich's reagent: pink or faint red color

  • Normal urine + 20% HCl : no pink color

  • कोई बदलाब न होने पर result  negative  रहेगा 

Urobilinogen detection by  Reagent  strip  test

Reagent  strip  test  : ये method  Ehrlich  test    के principle  पर कार्य करता है 


clinical significance of urobilinogen

high concentration  of urobilinogen may be caused by 

  • hemolytic disease

  • parasitic enterocolitis cirrhosis of the liver

  • Cirrhosis of liver

  • hepatic congestion 

extra Gyan

hemolytic disease : आरबीसी के distruction के फलस्वरूप bilirubin अधिक produce होता है जिससे urobilinogen भी अधिक मात्रा मे produce होता है (if bilirubin produced due to destruction  of RBC this will be  called hemolytic disease)

  • hemo : blood

  • lytic: lysis

  • disease: abnormality

parasitic enterocolitis  :  जब parasite  का infection  colon  मे हो तोः इस condition मे अधिक मात्रा मे urobilinogen intestine मे produce होता है

  • parasitic: pericyte

  • entero : inside

  • colitis : colen (intestine part)

cirrhosis of liver  : cirrhosis  मे liver  के healthy  tissue  का replacement  scar  tissue  से  कर दिया जाता है  जिससे liver  proper  functioning  नहीं करता है ये hepatitis  , alcohol  का सेवन करने से हो सकता है

hepatic congestion:  इस disease  मे urobilinogen  दोबारा absorb  होकर blood  circulation  से   liver  तक नहीं पाउच पता है 


Low concentration of urobilinogen may be caused by 


  • Obstruction in the bile duct

  • Destruction of normal bacterial flora (microbes )

  • The inability of liver cells to conjugate bilirubin 


Extra gyan


Obstruction in bile duct: Bile duct मे अबरोध उत्पन्न होने के कारन intestine मे bilirubin नहीं पूछेगा बा urobilinogen मे convert नहीं होगा जिसकी वजह से urine मे urobilinogen काम मात्रा मे मिलेगा

Destruction of normal bacterial flora (microbes ): अगर intestine के normal flora विनाश हो जाए तो bilirubin , urobilinogen मे convert नहीं हो पाएगा

Inability of liver cells to conjugate bilirubin : अगर liver UCB को सोलुबे फॉर्म (घुलनशील) conjugated bilirubin मे बदल पाए तोः urobilinogen urine से excrete नहीं होगा






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